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USP-NF2021

通則 < 71 > 

2020年版《中國藥典（四部）》

通則1101

差異描述

1

如需儲存培養基，應置無(wú)菌密閉容器中，在2～25 ℃環(huán)境下保存

制備好的培養基若不即時(shí)使用，應置無(wú)菌密閉容器中，在2～25℃、避光環(huán)境下保存

《中國藥典》培養基儲存條件多了“避光”要求

2

“硫乙醇酸鹽流體培養基”配制方法：將L -胱氨酸、瓊脂、氯化鈉、葡萄糖、酵母提取物和酪蛋白胰酶消化物與純化水混合，加熱至溶解。將硫乙醇酸鈉或硫乙醇酸溶解于上述溶

液，如必要，加入1N氫氧化鈉調滅菌后溶液pH為7.1±0.2，如需過(guò)濾，可再次加熱但不煮沸，趁熱用潤濕的濾紙過(guò)濾。加入刃天青鈉溶液，混合，分裝至適宜容器

“硫乙醇酸鹽流體培養基”的配制方法：取除葡萄糖和刃天青溶液外的各成分混合，微溫溶解，調pH為弱堿性，煮沸，濾清，加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調滅菌后25℃的pH為7.1±0.2。分裝至適宜容器

二者的配制方法在各成分的添加順序、調pH的具體試劑及具體加熱時(shí)間等方面略有不同

2

硫乙醇酸鹽流體培養基置30～35℃培養

除另有規定外，硫乙醇酸鹽流體培養基置30～35℃培養。接種生物制品的硫乙醇酸鹽流體培養基的容器應分成2等份，1份置30～35℃培養，1份置20～25℃培養

鑒于我國生物制品無(wú)菌檢查曾發(fā)現過(guò)個(gè)別品種在20～25℃培養的硫乙醇酸鹽流體培養基中有菌生長(cháng)的情況?！吨袊幍洹繁局?zhù)求同存異的整合原則，保留了生物制品該培養基分別置2個(gè)溫度范圍培養的規定

3

必要時(shí)，可使用“硫乙醇酸鹽替代培養基”代替“硫乙醇酸鹽流體培養基”

無(wú)

《中國藥典》無(wú)“硫乙醇酸鹽替代培養基”

3

對于無(wú)法采用薄膜過(guò)濾法檢測的含防腐劑汞的供試品，如已按照需氧菌、厭氧菌和真菌促生長(cháng)試驗所述方法進(jìn)行了驗證，可使用硫乙醇酸鹽流體培養基代替大豆酪蛋白消化物

培養基在20～25℃進(jìn)行培養

無(wú)

《中國藥典》無(wú)該說(shuō)明

4

“大豆酪蛋白消化物培養基”

“胰酪大豆胨液體培養基”（TSBTrypticSoyaBroth）

雖名稱(chēng)不同，但配方一致

4

“大豆酪蛋白消化物培養基”的配制方法：將配方中固體溶于純化水中，微溫溶解。將溶液冷卻至室溫，并用1N氫氧化鈉調滅菌后的pH為7.3±0.2

“胰酪大豆胨液體培養基”的配制方法：取除葡萄糖外各成分，

混合，微溫溶解，濾過(guò)，調滅菌后25℃的pH為7.3±0.2，加

入葡萄糖，分裝，滅菌

二者配制方法略有不同，如各成分的添加順序及調節pH的具體試劑等

5

青霉素或頭孢菌素用培養基

《中國藥典》將具有抑菌性供試品所需培養基統一概述在“中和或滅活用培養基”

名稱(chēng)不同

6

促生長(cháng)試驗中，接種少量（不大于100cfu）的生孢梭菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌至適量硫乙醇酸鹽流體培養基，每株菌均使用單獨的培養基。接種少量（不大于100 cfu）生孢梭菌至適量硫乙醇酸鹽培養基替代品。接種少量（不大于100cfu）的黑曲霉、枯草芽孢桿菌和白色念珠菌至適量大豆酪蛋白消化物培養基，每株菌均使用單獨的培養基

靈敏度檢查，取適宜裝量的硫乙醇酸鹽流體培養基7支，分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、生孢梭菌各2支，另1支不接種作為空白對照；取適宜裝量的胰酪大豆胨液體培養基7支，分別接種不大于100cfu的枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接種作為空白對照

促生長(cháng)試驗中，《美國藥典》包含了“硫乙醇酸鹽替代培養基”；

《中國藥典》則要求每種菌同時(shí)接種2支培養基，并另取1支作為空白對照

6

取部分培養基，培養14d，應無(wú)菌生長(cháng)

每批培養基一般隨機取不少于5支（瓶），置各培養基規定的

溫度培養14d，應無(wú)菌生長(cháng)

無(wú)菌性檢查中，《中國藥典》對于具體取樣數有明確規定

6

促生長(cháng)試驗

靈敏度檢查

名稱(chēng)不同，但試驗目的相同，均為檢查培養基的靈敏度

7

菌株來(lái)自ATCC

菌株來(lái)自CMCC

國別不同，菌株來(lái)源不同

8

稀釋液和沖洗液有：1）液體A；2）用于青霉素類(lèi)或頭孢菌素類(lèi)的液體A；3）液體D；4）液體K

稀釋液和沖洗液有：1）0.1%無(wú)菌蛋白胨水溶液；2）pH7.0無(wú)菌氯化鈉- 蛋白胨緩沖液；3）其他經(jīng)驗證的適宜溶液（如0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液）。如需要，可在上述液體中加入表面活性劑或中和劑等

除液體A即為0.1%無(wú)菌蛋白胨水溶液外，兩國藥典其他稀釋液和沖洗液均不同

9

方法適用性試驗用菌同促生長(cháng)試驗

方法適用性試驗用菌將大腸埃希菌替代銅綠假單胞菌作為

試驗用菌

《中國藥典》中發(fā)現，銅綠假單胞菌對一些抗革蘭陰性桿菌為主的抗生素不敏感，故選擇更敏感的大腸埃希菌更符合方法適用性試驗的目的

10

供試品檢驗需包括陰性對照試驗

供試品檢驗需同時(shí)進(jìn)行陽(yáng)性對照試驗和陰性對照試驗

《中國藥典》無(wú)菌檢查法一貫強調應同時(shí)進(jìn)行供試品的陽(yáng)性對照試驗

11

如供試品具有抑菌性，需用沖洗液沖洗濾膜不少于3次，沖洗液種類(lèi)及用量同方法適用性試驗。每張濾膜均不得沖洗超過(guò)5次，每次100mL，即使方法適用性試驗表明該沖洗方法

不能完全清除供試品抑菌性，也不必增加沖洗次數

如供試品具有抑菌作用，須用沖洗液沖洗濾膜，沖洗次數一般不少于3次。每張濾膜每次沖洗量一般為100mL，總沖洗量一般不超過(guò)500mL，最高不得超過(guò)1000mL，以避免濾膜上

的微生物受損

《中國藥典》中要求應盡可能通過(guò)沖洗消除抑菌活性，對于超過(guò)1000mL/膜仍不能完全消除抑菌作用的供試品，會(huì )采用中和、分膜等操作進(jìn)一步消除

12

無(wú)菌氣霧劑產(chǎn)品

無(wú)菌氣霧劑供試品

《中國藥典》更詳細地描述了氣霧劑供試品取樣操作的具體方式和步驟

13

供試品接入量應不超過(guò)培養基體積的10%

供試品接入量應不超過(guò)培養基體積的10%。硫乙醇酸鹽流體

培養基裝量應不低于15mL，胰酪大豆胨液體培養基裝量應不低于10 mL。一般樣品2種培養基接種的瓶或支數相等。

生物制品接種硫乙醇酸鹽流體培養基和胰酪大豆胨液體培養基的瓶數或支數為2∶1

《中國藥典》的要求可防止一些用太少的接種量和太少的培養基用量的操作，保證微生物有足夠的營(yíng)養生長(cháng)以及對試驗結果進(jìn)行觀(guān)察和判斷

14

如果供試品使培養基渾濁，導致目視檢查不能確定是否存在微生物生長(cháng)，則在培養開(kāi)始14 d后，將部分培養基（每份不少于1mL）轉種至同種新鮮培養基中，將原始培養物和新接種的培養基繼續培養不少于4d

如在加入供試品后或在培養過(guò)程中，培養基出現渾濁，培養14d后，不能從外觀(guān)上判斷有無(wú)微生物生長(cháng)，可取該培養液不少于1mL轉種至同種新鮮培養基中，將原始培養物和新接種的培養基繼續培養不少于4 d；或取培養液涂片，染色，鏡檢，判斷是否有菌

確認培養結果時(shí)，對于目視檢查不能確定是否存在微生物生長(cháng)的情況，《美國藥典》僅提及了轉種的方式，《中國藥典》提及也可涂片檢測是否有菌