酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)測定實(shí)驗組織樣本制備處置辦法
日期:2022-01-19 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:1261 次
以便切實(shí)保障ELISA實(shí)驗報告的準確性,在收集整理樣本前務(wù)必有完善的計劃方案。中海生物覺(jué)得新鮮樣本應及早檢查測驗,收集整理后七天內檢查測驗的樣本應在四度環(huán)境儲藏預留。如果有較為特殊緣由應該定期進(jìn)行收集整理樣本,告知樣本按時(shí)封裝,并在零下二十度至零下八十度儲藏。主要是因為冷藏柜與室內溫度存有相應的溫度差,蛋白質(zhì)更易生物降解,同時(shí)影響到科學(xué)試驗品質(zhì),于是應防止重復融凍。請結合自身的實(shí)際情況正確處理各種不同的酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)測定實(shí)驗中血清/血漿/尿液/細胞培養上清/組織樣本制備處置辦法。
㈠血清:室內溫度下的血液自然而然凝結十至二十每分鐘,以每分鐘兩三千轉離心二十分鐘左右。謹慎收集整理上清液,假如儲藏環(huán)節中發(fā)生沉淀物,需重新離心。
㈡血漿:抗凝劑應結合樣本標準要求選取乙二胺四乙酸或檸檬酸鈉。以每分鐘兩三千轉離心混和十至二十每分鐘后,謹慎收集整理上清液,假如在儲藏環(huán)節中生成沉淀物,重新離心操作。
㈢尿液:用沒(méi)有細菌試管收集整理,以每分鐘兩三千轉離心二十分鐘左右。謹慎收集整理上清液,假如在儲藏環(huán)節中生成沉淀物,重新離心。
㈣細胞培養上清:檢查測驗分泌成份時(shí),用沒(méi)有細菌管收集整理。中海核查測驗細胞內成份時(shí),細胞懸液用PH7.2~7.4的PBS緩沖液稀釋?zhuān)毎麧舛戎祵?shí)現一百萬(wàn)/毫升左右。重復融凍會(huì )損傷細胞,釋放出來(lái)細胞內成份。以每分鐘兩三千轉離心二十分鐘左右。謹慎收集整理上清液。假如在儲藏環(huán)節中生成沉淀物,應重新離心。
㈤組織樣本:切好樣本后稱(chēng)重,添加足量PH7.2~7.4的PBS緩沖液,用液氮冷凍儲藏預留。樣本溶化后維持在二至八度。添加足量PH7.2~7.4的PBS緩沖液,用手或勻化器完全勻化樣本。其中一部分包裝檢測,剩余的冷藏預留。
結合有關(guān)資料,樣本收集整理后應及早提煉,提煉后應及早開(kāi)展科學(xué)試驗。中海生物技術(shù)假如不能馬上開(kāi)展試驗檢測,可將樣本儲藏在零下二十度,但應防止重復融凍。含疊氮化鈉的樣本不能檢查測驗,由于疊氮化鈉抑制辣根過(guò)氧化物酶的活力。
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