伊紅美藍瓊脂培養基EMB原理配方用途方法
日期：2022-04-07 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽：2800 次
㈠伊紅美藍瓊脂培養基原理:
伊紅美藍瓊脂培養基算是弱選擇性培養基，英文簡(jiǎn)稱(chēng)EMB培養基，通常用于分離鑒別腸道致病菌，尤其是大腸菌群和糞大腸菌群。蛋白胨供應碳源\氮源\維生素\生長(cháng)因子等營(yíng)養物質(zhì)；乳糖是由大腸桿菌發(fā)酵的碳水化合物；磷酸氫二鉀是培養基pH緩沖劑；瓊脂是培養基的凝固劑；伊紅又稱(chēng)曙紅或四溴熒光素，為酸性染料，美藍又稱(chēng)亞甲藍，為堿性染料。它們都被用作培養基中的鑒別指示劑，以抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng)。
大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)，細菌帶正電，因此被染成紅色，再與美藍結合，產(chǎn)生紫黑色菌落，有金屬光澤；產(chǎn)氣腸桿菌呈褐色，幾乎沒(méi)有金屬光澤。乳糖分解菌/沙門(mén)氏菌和志賀氏菌為乳糖發(fā)酵微生物，產(chǎn)生無(wú)色/透明或琥珀色菌落；凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌是具有無(wú)色針尖的菌落；白色念珠菌是蜘蛛絲或羽毛菌落。不致病/乳酸不發(fā)酵的革蘭氏陰性菌也會(huì )在培養基上生長(cháng)，需要通過(guò)其他的生化試驗來(lái)分辨。
㈡伊紅美藍瓊脂培養基EMB配方：
| 成分（g/L） |
蛋白胨：10.0 |
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瓊脂粉：14.0 |
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氯化鈉：5.0 |
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伊紅：0.4 |
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乳糖：10.0 |
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美藍：0.065 |
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牛肉浸出粉：3.0 |
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| 溫度：25℃ | PH值：7.0~7.4 |
㈢伊紅美藍瓊脂培養基用途方法:
稱(chēng)取中海伊紅美藍瓊脂培養基干粉37.4g克，添加1.0升蒸餾水或去離子水，攪拌加熱煮沸至完全溶解，在一百二十一度高壓滅菌十五分鐘后備用。
使用中海生物伊紅美藍培養基鑒定水中大腸桿菌，具體操作流程如下所述:
⒈制作伊紅美藍培養基，趁熱注入培養皿，濃縮成平板備用。
⒉取河水或溝水于高溫滅菌錐形瓶中，以1比10稀釋。
⒊在伊紅美藍培養基上接種0.1毫升稀釋液。用劃線(xiàn)平板法分離。
⒋將劃線(xiàn)培養皿倒置，三十七度放置十八至二十四小時(shí)。培養基中會(huì )出現大腸桿菌菌落，深藍色黑色點(diǎn)有金屬光澤或無(wú)光澤。
⒌將菌落接種在斜面培養基上，由營(yíng)養瓊脂培養基制作而成。
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