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    LuriaBertani固體液體培養基組成成分與配制

    日期:2021-07-16 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:1400 次

    LB培養基(LuriaBertani)是具有典型性的進(jìn)行各種細菌培養使用,是分子生物學(xué)的常規試劑。LB固體培養基粉劑主要是由胰蛋白胨/酵母提取物/氰化鈉瓊脂粉組成,充分溶解于無(wú)菌水中,加熱制成固體平板(如果嚴格要求無(wú)菌,則應進(jìn)行高壓滅菌)。

     

    中海LB培養基組成成分:

    LB培養基組成成分

    壹升LB固體培養基是和液體一樣,加入15克瓊脂粉,根據實(shí)際操作經(jīng)驗將培養基中加入氫氧化鈉調節pH在7.0~7.4之間。此pH值適合應用最廣泛的原核表達菌株大腸桿菌的生長(cháng)。

     

    LB固體培養基

    一定要在溫度下降前加入抗生素,然后將LB固體培養基倒入平板。

    ㈠LB培養基制備:100毫升LB培養基加入1.5克瓊脂粉

    ㈡添加抗生素:高壓蒸汽滅菌再將已融化的LB固體培養基放入55℃熱水中。當培養基溫度降到55℃時(shí),可以觸摸添加抗生素并搖勻,以免因溫度過(guò)高導致抗生素失效??股亟K濃度為氨芐青霉素 100微克/毫升,卡那霉素 50微克/毫升。

    ㈢倒入平板:將中 海培養基倒入培養皿后,打開(kāi)蓋子,在紫外線(xiàn)下照射十至十五分鐘。通常十毫升倒壹板。

    ㈣LB培養基儲存:封邊用封口膠封口,倒置四度環(huán)境保存,三十天內使用。

     

    LB液體培養基

    中海生物準備每升培養基,要加入九百五十毫升DI水中,搖動(dòng)容器直至溶質(zhì)溶解。用5mol/L 氫氧化鈉 調節 pH 至 7.0~7.4。用去DI水定容至壹升。在15psi(kgf/cm²)高壓下蒸汽滅菌二十分鐘。中海LB肉湯培養基通常用于生化分子實(shí)驗中對菌株進(jìn)行預培養,使菌株增殖達到要求用。培養的菌株一般都經(jīng)過(guò)修飾,不能暴露于外界。僅在環(huán)境中生存和繁殖的工程細菌。通過(guò)中'海培養工程菌,我們可以制備更多的外源蛋白,同時(shí)能得到帶有外源基因的質(zhì)粒。工程菌的有效擴增是生化分子實(shí)驗的基礎。


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