在酶聯(lián)免疫實(shí)驗操作的過(guò)程中常常會(huì )存在復測問(wèn)題，即咱們常常說(shuō)的花板問(wèn)題，此種問(wèn)題影響到檢驗檢測結論的準確判定，對工作任務(wù)帶來(lái)相應的不良影響，如若產(chǎn)生花板現象，實(shí)驗操作結論務(wù)必選擇放棄，中海生物操作員需再次開(kāi)展檢驗檢測，不但消耗原材料和時(shí)長(cháng)，同時(shí)還可能會(huì )存在樣本量缺失/交叉式被污染/匯報時(shí)間延遲等多方面問(wèn)題。

㈠標本問(wèn)題

要嚴格規范正確處理樣本，預防血漿層大規模溶血和異物，使用一次性采樣槍頭，避免交叉污染。血清和血漿均可用于檢測，但血清的分離應在血液完全凝固后進(jìn)行離心操作。

㈡試劑問(wèn)題

保存并正確使用有效試劑。與金屬容器接觸的過(guò)期試劑和底物的使用，以及底物混合后較長(cháng)的儲存時(shí)間都影響實(shí)驗結果的準確性。中海選擇試劑時(shí)，應選擇靈敏度高\特異性好\穩定性好\批間差異小的試劑。不同制造商的試劑不應混合，包括底物和洗滌液。測試前，獸用診斷試劑應在室溫下放置半小時(shí)進(jìn)行平衡，現在應準備好清洗液。同時(shí)中海生物觀(guān)察濃縮清洗液中是否有結晶。如果有結晶，放入三十七度的水浴中融化后再使用。

㈢操作問(wèn)題

嚴格按照相關(guān)實(shí)驗室的標準操作規程進(jìn)行試驗。中海生物技術(shù)人員添加樣品時(shí)，盡可能垂直添加樣品，并將其添加到涂層孔的底部。注意：不要過(guò)度用力破壞底部涂層材料，也不要將其添加到孔的上部和外部。

㈣溫浴問(wèn)題

當水浴箱用作溫水浴裝置時(shí)，應注意水深對結果的影響。當水浴箱中水的實(shí)測溫度為三十七度時(shí)，水面溫度可能只有三十四度，空氣溫度更低，甚至只有二十多度。因此當水浴箱內水位過(guò)低時(shí)，酶標微孔板不會(huì )浸入水中，反應溫度不會(huì )達到三十七度，會(huì )相應影響酶促反應。為了防止邊緣效應，酶聯(lián)免疫吸附試驗板應盡可能浸入水中，從而保證加熱均勻。水浴中，海應密封酶聯(lián)免疫吸附試驗板，防止水滴滴入包被孔或陽(yáng)性樣品蒸發(fā)。嚴格控制暖浴時(shí)間，不要為了早出效果而隨意縮短暖浴時(shí)間。

㈤洗板機問(wèn)題

廢液瓶裝滿(mǎn)后要及時(shí)倒空，防止廢液回流污染管道，導致沖洗不徹底，容易出現花板。洗完板后用蒸餾水徹底清洗管道，防止廢液殘留在管道內。同時(shí)應根據中海儀器維護程序定期維護洗衣機。

㈥酶標儀問(wèn)題

酶標儀應放在遮陽(yáng)避光的地方，比色前應打開(kāi)預熱十五至三十分鐘，這樣測定結果會(huì )更穩定。為防止顯色加深或減弱，顯色時(shí)間結束后應立即滴止液，避免產(chǎn)生氣泡，十分鐘內完成比色。將酶標板從水浴箱中取出后，擦去孔底的水滴。如果有水滴或紙屑殘留在孔底，酶標閱讀器的讀數就會(huì )出現錯誤，往往被誤判為花板。

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