生物緩沖液（PBS、HEPES）優(yōu)缺點(diǎn)對比
日期：2022-06-10 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽：2210 次
生物緩沖液能有效穩定水溶液的pH值，所以被大量應用于生物實(shí)驗中。殊不知，以往常用的傳統緩沖液，如碳酸鹽緩沖液和磷酸鹽緩沖液，不適用來(lái)某些生物實(shí)驗中。這些試劑在pH7.5以上不能有效緩沖，會(huì )形成某些干擾反應。所以，1966年NormanGood博士等人提出了一系列兩性離子緩沖液，可以解決傳統緩沖液的局限性。這些緩沖液的pKa值等于或接近生理pH值，對細胞無(wú)毒，不會(huì )被細胞膜吸收。在此中海生物技術(shù)小編簡(jiǎn)述一下經(jīng)常使用的PBS緩沖劑和HEPES生物緩沖液優(yōu)缺點(diǎn)。
生物緩沖液（PBS、HEPES）優(yōu)缺點(diǎn)對比
| PBS | HEPES | |
| 有效的pH范圍 | 5.8-8.0 | 6.8-8.2 |
| 生物毒性 | 不具生物毒性 | |
| 滲透壓 | 具備等滲透壓的特性，可防止細胞破裂。 | 使用 0.1 M HEPES 顯著(zhù)提高了培養基的滲透壓。 |
| 細胞活力 | PBS 稀釋的細胞培養樣品可能會(huì )無(wú)意中降低細胞活力。 | HEPES 緩沖系統中可以看到更高的最大細胞密度和活力。 |
| 與金屬離子的關(guān)系 | 與部分金屬離子結合會(huì )產(chǎn)生絡(luò )合物或沉淀。 | 可以忽略不計的金屬離子產(chǎn)生絡(luò )合物或沉淀。 |
| 與酶促反應的關(guān)系 | 可能會(huì )抑制酶促反應 | 適合用于酶促反應 |
| HClO熒光檢測 | 適用 | 不適用 |
| 在冷凍情況下的變化 | PBS 溶液的冷凍導致顯著(zhù)的 pH 變化。 | HEPES 溶液的冷凍不會(huì )導致 pH 變化。 |
| 用于電子顯微鏡研究的前綴固定劑 | 由于磷酸鹽與二價(jià)陽(yáng)離子有關(guān)。較高濃度的PBS會(huì )導致嚴重沉淀，從而阻止細胞有效過(guò)濾到過(guò)濾器上使用 | Hepes 代替 PBS 避免了這種沉淀 |
| 用于層析法 | 于層析法中適用 | |
| 高壓滅菌 | 可以高壓滅菌 | 不可以高壓滅菌 |
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