馬鈴薯葡萄糖瓊脂(Pda)培養基配方制備方法操作步驟與注意事項
日期:2021-12-03 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:4428 次
中海生物PDA培養基全稱(chēng)為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基,其主要供霉菌和酵母菌計數及分離培育(GB4789.15-2010和ISO標準)。它用來(lái)各類(lèi)大大小小的微生物檢測實(shí)驗操作。
馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA)配方 | ||
馬鈴薯 | 200g | 提煉浸出粉,有利于各種霉菌的生長(cháng)發(fā)育 |
葡萄糖 | 20g | 葡萄糖可以提供能量 |
瓊脂 | 14-20g | 培養基的凝固劑 |
水 | 1000ml | |
氯霉素 | 0.1g | 能抑制細菌病毒的生長(cháng)發(fā)育 |
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(Pda)培養基制備方法操作流程步驟
步驟⑴洗凈去皮
洗凈去皮馬鈴薯二百克,葡萄糖二十克,瓊脂十四至二十克。
步驟⑵加水煮爛
將馬鈴薯用刀切割成小塊,放進(jìn)鍋中,增添1000毫升水,燒開(kāi)二十至三十分鐘左右,能被玻璃棒捅破就可以了。
步驟⑶過(guò)濾殘渣
用八層紗布過(guò)濾馬鈴薯渣。
步驟⑷增添瓊脂
加熱后依據據具體實(shí)驗操作復需要加十四至二十克瓊脂,繼續加熱攪拌混勻,待瓊脂充分均勻溶解完。
步驟⑸定容一千毫升
增添葡萄糖二十克,攪拌均勻,待所有葡萄糖充分均勻溶解后,稍冷卻后添加適量的水,填補加熱操作過(guò)程中流失的水分,并將體積設定為一千毫升。
步驟⑹分開(kāi)包裝細節
按照各種不同的實(shí)驗操作目的,中海制備PDA培養基可以分開(kāi)包裝在試管或三角瓶中。在分開(kāi)包裝操作過(guò)程中,需要留意不能污染PDA培養基瓶口,以防打濕棉條導致污染。假如不使用棉塞,還可以用橡膠塞或專(zhuān)用的金屬塑料試管帽。為了更好地讓空氣隨意出入,膠塞不可過(guò)緊,消毒滅菌前要在噴嘴處夾住一條棉紗線(xiàn)。分開(kāi)包裝后,在管口或瓶口處放一個(gè)棉塞。棉塞應由未脫脂的彈性棉制成。棉塞可以過(guò)濾空氣,預防細菌病毒侵入,緩減馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(pda)中水的揮發(fā),從而被普遍使用于植物病理學(xué)研究。
步驟⑺試管標注
封堵后,用細繩將試管扎好,然后在棉塞上包裹一層牛皮紙,預防消毒滅菌時(shí)冷凝水打濕棉塞,再用細繩扎好。用標記筆標注馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基的名稱(chēng)/制備日期/組和生產(chǎn)商。
步驟⑻消毒滅菌
馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基在0.103兆帕、121度的高壓蒸汽下消毒滅菌二十分鐘左右,冷卻后貯藏備用。
常見(jiàn)馬鈴薯葡萄糖瓊脂(pda)培養基注意事項:
①消毒滅菌后,中海PDA培養基務(wù)必在三十七度恒溫培養箱中培育一天,無(wú)菌生長(cháng)者方可使用。
②PDA培養基通常不用調控ph酸堿度,但對于需要調控ph酸堿度的中.海培養基,通常用ph試紙來(lái)測量其酸堿度,如果馬鈴薯培養基是偏酸性或堿性的,可以用氫氧化鈉或鹽酸溶液調控。調控時(shí)應逐滴添加氫氧化鈉或鹽酸溶液,以避免局部過(guò)酸或過(guò)堿毀壞培養基成份。
③大家在使用時(shí)也可制成沒(méi)有瓊脂的液體培養基,用來(lái)做真菌的搖瓶培養。
④馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基中'海還能夠添加氯霉素或土霉素,添加量為0.2克/升培養基,主要是抑制細菌病毒的生長(cháng)發(fā)育降低影響。
本文鏈接:http://m.91anmoyi.cn/news/wenku-pdapeizhi.html