配制培養基時(shí)的注意事項以及常見(jiàn)問(wèn)題分析
日期:2023-10-25 | 中海生物技術(shù)文庫 | 瀏覽:1081 次
培養基在滅菌前,需進(jìn)行加熱溶解(含瓊脂的培養基需煮沸4-6次至瓊脂完全溶解),再進(jìn)行分裝滅菌(應不超過(guò)1000mL);
含瓊脂培養基,若滅菌前未進(jìn)行加熱溶解,滅菌后需充分搖勻使用;
所有培養基不宜滅菌過(guò)度和長(cháng)時(shí)間保溫,特別是含糖量高的培養基,如沙氏葡萄糖瓊脂,滅菌過(guò)度或保溫時(shí)間過(guò)長(cháng)易使葡萄糖發(fā)生焦化,滅菌后的培養基顏色會(huì )變深,pH會(huì )下降,此外還會(huì )使蛋白胨中的維生素分解,降低培養基的營(yíng)養;
需另加添加劑的培養基通常在培養基冷卻至50℃左右時(shí)加入,已加入添加劑的瓊脂類(lèi)培養基不可熔化再次使用;
配制好的培養基需及時(shí)滅菌,不可久置;
培養基不可重復滅菌;
瓊脂培養基不可反復熔化使用;待用的瓊脂培養基可置47-50℃水浴保溫或50-60℃烘箱保溫,一般不可超過(guò)4小時(shí);
使用蒸餾水或純化水配制。飲用水或自來(lái)水中由于含礦物鹽離子,配制培養基會(huì )產(chǎn)生渾濁現象;
容器不易過(guò)滿(mǎn),容量至少應比培養基體積大20%。
(1)稱(chēng)量錯誤
(2)瓊脂分布不均勻
(3)培養基pH不正確
(4)加熱過(guò)度
(5)瓊脂量不足
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