在ELISA試驗測定方法中有不少因素影響，其實(shí)際操作流程還是要遵循相應的技術(shù)規范和要求。除正常反應之外，中海在檢查核驗中還常常見(jiàn)到出現假陽(yáng)性或假陰性結果問(wèn)題。以下是中海生物技術(shù)總結解析做ELISA實(shí)驗失敗zhzbio.comELISA試驗不成功的四個(gè)關(guān)鍵要點(diǎn)：

ELISA實(shí)驗失敗關(guān)鍵要點(diǎn)?標本自身的影響:

溶血標本和混有紅細胞的血清經(jīng)ELISA法試驗檢測易產(chǎn)生假陽(yáng)性?？赡苁羌t細胞中的血紅素或溶血血清中包含過(guò)氧化物酶的紅蛋清，在清洗過(guò)程中通常不容易完全洗干凈。它能使過(guò)氧化氫釋放原始氧，從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性有色物質(zhì)，即變成藍色，產(chǎn)生假陽(yáng)性。造成嚴重溶血標本禁用。

ELISA試驗不成功關(guān)鍵要點(diǎn)?標本被細菌病毒感染:

因為細菌病毒或許包含內源性辣根過(guò)氧化物酶，被真菌感染的樣品與溶血樣品一致，或許產(chǎn)生非特異性顯色，勢必會(huì )影響ELISA實(shí)驗測定方法最終結果。

ELISA實(shí)驗失敗關(guān)鍵要點(diǎn)?標本儲藏保管不合理:

標本在冰箱中放置時(shí)長(cháng)太久，會(huì )造成間接ELISA測定本底過(guò)深，產(chǎn)生假陽(yáng)性。為了更好地克服上述影響，ELISA試劑盒測定方法的血清樣品應新鮮采集。如無(wú)法馬上測定方法，可將五日內測定方法的血清樣品儲存在四攝氏度，七天過(guò)后測定方法的血清樣品應較低溫度冷藏。冷凍儲藏和解除凍結的標本，造成雞蛋白質(zhì)部分集中化，不均勻分布，應充分融合后進(jìn)行測量。此時(shí)應當輕輕地融合，無(wú)需明顯振蕩。

ELISA試驗不成功關(guān)鍵要點(diǎn)?標本凝結并不充分:

日常工作，偶而為了更好地贏(yíng)得快速檢測的時(shí)長(cháng)，通常在血液進(jìn)行凝結前，利用強制離心分離血清，使一部分纖維蛋白原殘留在血清中，中海ELISA測定方法時(shí)可產(chǎn)生看得見(jiàn)的纖維蛋白塊，易于產(chǎn)生假陽(yáng)性最終結果。于是采集后應當使血樣充分凝結，接著(zhù)進(jìn)行血清分離。

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