培養基的成分確定后，每種營(yíng)養物質(zhì)的濃度和比列要合適，要達到微生物生長(cháng)的最適條件下微生物才能迅速生長(cháng)。營(yíng)養物質(zhì)的濃度太低不能滿(mǎn)足微生物的生長(cháng)需要，太高又會(huì )抑制微生物的生長(cháng)。比如金屬離子是微生物生長(cháng)不可缺少的礦物質(zhì)養分，但如果礦物質(zhì)的濃度過(guò)大就會(huì )抑制菌體的生長(cháng)，甚至殺死菌體。碳氮比（C/N）是影響微生物生長(cháng)繁殖和代謝積累的重要因素，常作為一個(gè)指標來(lái)衡量之間的搭配，如在谷氨酸發(fā)酵中，當培養基（C/N）比為4：1時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸積累減少；當培養基（C/N）比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受到抑制，谷氨酸大量增加。一般培養基碳氮比（C/N）為100:（0.5-2）。

在設計培養基時(shí)，除微生物營(yíng)養物質(zhì)之間的比列外，pH值也是微生物生長(cháng)繁殖和代謝積累很重要的一個(gè)環(huán)境指標。一般來(lái)說(shuō)，細菌適合pH值7.0-7.5，酵母菌為3.8-6.0，霉菌為4.0-5.8，放線(xiàn)菌為7.5-8.5。但微生物在生長(cháng)代謝過(guò)程中，由于營(yíng)養物質(zhì)的利用以代謝產(chǎn)物的形式積累，有時(shí)會(huì )引起pH值的變化，因此為了維持培養基pH值的相對穩定，特殊情況下需要在培養基中加入pH緩沖劑，來(lái)調節pH值滿(mǎn)足微生物在生長(cháng)范圍內。如在培養基中常用磷酸鹽（K2HPO4和KH2PO4）作緩沖劑,因為K2HPO4是堿性，KH2PO4是酸性，當微生物代謝導致酸性物質(zhì)積累，H+含量增加時(shí)，這時(shí)的弱堿物質(zhì)K2HPO4變成了弱酸鹽KH2PO4，溶液的pH值降低不大；反之，OH-增加時(shí)，這時(shí)弱酸鹽KH2PO4變成了弱堿鹽K2HPO4，溶液的pH值升高不大。

調節培養基的滲透壓

微生物的細胞膜是半透膜，在低滲透壓的條件下，當外部環(huán)境溶液濃度低于細胞內部環(huán)境，水分子會(huì )由低滲透溶液進(jìn)入細胞，導致細胞的膨脹甚至破裂；反之，當外部環(huán)境溶液濃度高于細胞內部環(huán)境，滲透會(huì )迫使水從細胞內部擴散出來(lái)，導致細胞皺縮，細胞壁與細胞膜分開(kāi)（質(zhì)壁分離）。因此，微生物只有在等滲的條件下才能生長(cháng)。所以在配制培養基的過(guò)程中，要控制好各營(yíng)養物質(zhì)的濃度大小。通常在培養基中適當加入氯化鈉以提高滲透壓。

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